Coriell Institute细胞的实验和使用方法介绍

　　一、CoriellInstitute细胞实验方法：

　　药敏片的制备：一般情况下，如无法获取，可以自行制备。首先定性滤纸，用内径为6mm的打孔器制备好纸片，按每包100片包装好，高压灭菌，烘干备用。然后，将待检药物用蒸馏水按实际用量的10倍稀释，充分溶解后，取1mL加到100片灭菌好的纸片上，放入4℃冰箱，待其充分吸收后（一般要4－8小时），平铺于平皿上，在37℃温箱中充分烘干，干燥后立即封装于灭菌的小瓶内，密闭保存。

　　二、使用方法：

　　培养基的制备：用托盘天平称取营养琼脂4克，加入洁净的容器内，再用量筒加入200mL蒸馏水，121℃，灭菌20分钟。灭菌后，冷却至50－60℃，在超净台内，迅速将培养基倒入灭菌的培养皿内，每个平皿15mL左右，轻摇平皿，使培养基分布均匀。待其冷却凝固后，即可使用。

　　谷酰胺脱掉基后，可作为培养细胞的能量来源，参与蛋白质的合成和能量代谢。在缺少谷酰胺时，细胞生长不良而死亡。所以，各种培养液中都含有较大量的谷酰胺。谷酰胺在溶液中很不稳定，应置-20℃冰冻保存，用前加入培养基中。加有谷酰胺的液体培养基4度冰箱储存两周以上时，应重新加入原来量的谷酰胺。

　　CoriellInstitute细胞试验操作中常配制高浓度(100倍)的谷酰胺溶液(1ml/支)，分装使用，-20℃保存。使用时，每支1ml的谷酰胺加入到99ml*培养基中，使其浓度为2mM培养基。