Megazyme试剂盒的使用步骤

Megazyme试剂盒将目标抗体包被于微孔板中，制成固相载体，向微孔中分别加入标准品或标本，其中的目标连接于固相载体上的抗体结合，然后加入微生物化的目标抗体，将未结合的生物素抗体洗净后，加入标记和亲和素，在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成黄色，颜色的深浅和样品中的目标呈正相关，用酶标仪在450nm波长下测定吸光度，计算样品浓度。

　　该试剂盒经过改进后，更加快速和灵敏，灵敏度是传统己糖激酶法的两倍，成本低，试剂配制后可稳定保存2年， 采用试剂盒形式，包含检测必需的所有酶，提供计算软件，使数据处理更方便，包含标准品。原理上，将单位体积的谷物面粉提取物或发酵肉汤培养基在条件下用底物混合物孵育，通过加入弱碱性溶液终止反应并使溶液变色，测定400nm下的吸光度值，该值与样品中α-淀粉酶的含量直接相关。         

　　Megazyme试剂盒操作步骤

　　①从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条，剩余板条用自封袋密封放回4℃。

　　②设置标准品孔和样本孔，标准品孔各加不同浓度的标准品50μL；

　　③样本孔先加待测样本10μL，再加样本稀释液40μL；空白孔不加。

　　④除空白孔外，标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体100μL，用封板膜封住反应孔，37℃水浴锅或恒温箱温育60min。

　　⑤弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸上拍干，如此重复洗板5次。